Constellation, le dépôt institutionnel de l'Université du Québec à Chicoutimi

Résumé

La forêt boréale occupe plus de la moitié du territoire du Canada. Cette ressource variée est à la base de plusieurs activités telles que l’économie, la culture et les activités récréatives. Depuis plusieurs années, l’utilisation durable et responsable de la forêt est devenue un enjeu d’importance pour préserver cette richesse. Les produits naturels offrent de grandes possibilités de développement pour la médecine moderne. L’objectif du présent projet est d’isoler et d’identifier des composés responsables des activités anti-inflammatoires et antioxydantes d’une espèce de la forêt boréale : le kalmia à feuilles étroites (Kalmia angustifolia Linné.). Les informations recensées dans la médecine traditionnelle amérindienne rapportent que ces derniers utilisaient cette plante pour les problèmes inflammatoires. Lors du criblage de l’activité de la plante, plusieurs activités in vitro (antioxydante, cytotoxicité et anti-inflammatoire) ont été évaluées pour différents extraits de Kalmia angustifolia L. Le meilleur résultat anti-inflammatoire a été obtenu des feuilles avec une IC50 de 12 ± 4 μg/ml pour l’extrait au dichlorométhane. Le meilleur résultat antioxydant est celui des tiges (extrait méthanolique à reflux) avec une valeur ORAC de 15 ± 5 μmol Trolox/mg et un IC50 de 0,62 ± 0,05 μg/ml pour l’antioxydant cellulaire. En fonction des résultats d’activités et des masses disponibles, c’est l’extrait méthanolique à reflux des tiges qui a été sélectionné pour débuter les travaux de fractionnement. L’éthanol a été substitué au méthanol pour la suite des travaux en raison de la toxicité du méthanol. L’extrait éthanolique des tiges a par la suite été fractionné par extraction liquide-liquide (hexane, dichlorométhane, butanol, eau) et la fraction à l’hexane a montré la meilleure activité anti-inflammatoire. Cette fraction a donc été purifiée sur colonne de gel de silice. Des fractions obtenues, c’est la troisième fraction qui a été retenue pour l’isolation de composés. C’est à cette étape que l’alpha-amyrine, la bêta-amyrine, le dammaradienol et le tirucalla-7,24-dienol ont été identifiés. Une seconde série de fractionnement a également été réalisée à partir d’un extrait éthanolique des parties aériennes (tiges et feuilles). Une extraction liquide-liquide (dichlorométhane, acétate d’éthyle, eau) a été faite sur ce dernier. C’est la fraction à l’acétate d’éthyle qui a montré les meilleurs résultats avec une IC50 de 0,15 ± 0,01 μg/ml pour l’activité antioxydante cellulaire et une valeur ORAC de 16 ± 2 μmol Trolox/mg. Cette dernière a été fractionnée par colonne chromatographique et quatre fractions ont été obtenues (A, B, C et D), dont B, C et D ont fait l’objet de travaux d’isolation. De la fraction B, la catéchine et l’épicatéchine ont été identifiées. De la fraction C, l’avicularine, la proanthocyanidine A2 et l’epicatechin-(2β-O-7, 4β-6)-ent-epicatechin ont été identifiées. Le fractionnement de la fraction D a conduit à l’identification de l’asébotine et des grayanotoxines I et IV. L’alphaamyrine, la bêta-amyrine, le dammaradienol et le tirucalla-7,24-dienol isolés de la fraction à l’hexane issue de l’extrait éthanolique des tiges ainsi que l’avicularine et l’epicatechin-(2β-O-7, 4β-6)-ent-epicatechin de la fraction à l’acétate d’éthyle issue de l’extrait éthanolique des parties aériennes sont identifiées pour la première fois dans le Kalmia angustifolia L.